Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-Histona H4-R3 Simetricamente Dimetilada (P62805) para Pesquisa em Epigenética

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é uma das histonas centrais que constituem o nucleossomo eucariótico, em torno do qual o DNA se enrola para formar a cromatina. Ela desempenha um papel fundamental na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A modificação pós-traducional dinâmica das histonas, frequentemente denominada "código de histonas", governa a acessibilidade do DNA às proteínas regulatórias e é central para o controle epigenético. Referências relacionadas: UniProt P62805

A histona H4 está localizada principalmente no núcleo e se associa aos cromossomos. Durante a espermatogênese, a H4 acetilada é localizada no núcleo em espermátides no estágio 11. Referências relacionadas: UniProt P62805

A histona H4 sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e outras. A dimetilação simétrica no Arg3 (SDMA-H4R3) é catalisada pelas proteínas arginina metiltransferases PRMT5 e PRMT7 e está implicada na regulação transcricional. Referências relacionadas: UniProt P62805

Modificações adicionais incluem dimetilação assimétrica e citrulinização no Arg3, acetilação em múltiplos resíduos de lisina (por exemplo, K5, K8, K12, K16) e fosforilação em resíduos específicos de serina e tirosina. Essas marcas combinatórias definem estados distintos de cromatina. Referências relacionadas: PMID:11387442 PMID:11448779 PMID:15345777 PMID:16567635 PMID:21724829 PMID:15592455 PMID:20068231

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os 1-100 aminoácidos N-terminais da Histona H4 humana, o que inclui o resíduo Arg3 que é simetricamente dimetilado. Ao projetar experimentos, certifique-se de que a especificidade do anticorpo para esta modificação seja verificada usando controles apropriados de competição com peptídeo ou mutantes.
• Para Western Blot (WB), considere usar extratos nucleares de linhagens celulares humanas ou de rato. O peso molecular previsto é de ~11 kDa. Valide o tamanho da banda e a especificidade em seu sistema de amostra.
• Aplicações de Imunofluorescência (IF/ICC) podem exigir protocolos padrão de coloração nuclear. A co-coloração com corantes de DNA como DAPI pode ajudar a confirmar a localização nuclear.
• Dot Blot (DB) e ELISA podem ser empregados para quantificar os níveis de H4R3 simetricamente dimetilada em preparações de histonas ou lisados celulares. Esses ensaios são úteis para triagem de alto rendimento de inibidores ou ativadores de metilação.

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