Anticorpo Policlonico de Coelho para TGF beta 1 para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P01137

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TGF beta 1

• TGF-beta-1 é um membro da família do fator de crescimento transformador beta e é sintetizado como uma pró-proteína de 44 kDa que sofre clivagem proteolítica para gerar o complexo latente LAP-TGF-beta-1 (PubMed:29109152). Referências relacionadas: PMID:29109152
• Mantido em estado latente na matriz extracelular, a ativação do TGF-beta-1 é rigidamente controlada pela liberação mediada por integrina e pela interação com moléculas do meio como LRRC32/GARP, LRRC33/NRROS e LTBP1 (PubMed:19651619, PubMed:19750484, PubMed:2022183, PubMed:22278742, PubMed:28117447). Referências relacionadas: PMID:19651619, PMID:19750484, PMID:2022183, PMID:22278742, PMID:28117447
• Após a ativação, o TGF-beta-1 sinaliza via TGFBR1/TGFBR2 para fosforilar SMAD2/3, levando à translocação nuclear e regulação transcricional de genes envolvidos na EMT e migração celular (PubMed:20207738, PubMed:25893292, PubMed:29483653, PubMed:30696809). Referências relacionadas: PMID:20207738, PMID:25893292, PMID:29483653, PMID:30696809
• O TGF-beta-1 desempenha um papel crítico na homeostase imunológica ao direcionar a diferenciação de linfócitos T CD4+: níveis elevados promovem o desenvolvimento de Treg, enquanto níveis baixos associados a IL-6 e IL-21 favorecem a polarização Th17.
• No osso e na cartilagem, o TGF-beta-1 estimula a atividade de osteoblastos e a produção de colágeno, contribuindo para a remodelação óssea e a patologia da osteoartrite (PubMed:25310401, PubMed:11746498, PubMed:17827158). Referências relacionadas: PMID:25310401, PMID:11746498, PMID:17827158
• A proteína é secretada no espaço extracelular e na matriz; contém pontes dissulfeto, N-glicosilação e um sítio de clivagem dibásico necessário para a ativação.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 30-280) inclui o domínio LAP, que é altamente conservado entre o TGF-beta-1 humano, de camundongo e rato, sustentando a reatividade cruzada relatada. Confirme a reatividade na sua espécie alvo se estiver usando outros modelos.
• Para Western blot (WB), espere o pró-TGF-beta-1 a ~44 kDa em condições redutoras; a forma madura de ~12,5 kDa também pode ser detectada dependendo da preparação da amostra e do estado de ativação. Valide com controles positivos adequados.
• Em IHC-P, otimize a recuperação de antígeno (por exemplo, tampão citrato, pH 6,0) e use um sistema de detecção livre de biotina para minimizar o fundo. Valide a coloração com controles de isotipo.
• Para IF/ICC, permeabilize as células (por exemplo, 0,1% Triton X-100) e inclua um controle sem anticorpo primário para avaliar a especificidade.
• Aplicações em ELISA podem exigir o pareamento com um anticorpo de captura; considere a natureza policlonal do anticorpo ao desenvolver ensaios sanduíche.

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