Anticorpo policlonal de coelho contra a tromboxano sintase para WB, ELISA - P24557

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da tromboxano sintase

• A tromboxano-A sintase (TBXAS1, CYP5A1, TXAS) é uma enzima da família do citocromo P450 central na via metabólica do ácido araquidônico.
• Catalisa a conversão da prostaglandina H2 (PGH2) em tromboxano A2 (TXA2), um potente vasoconstritor e indutor da agregação plaquetária. Produz simultaneamente ácido 12-hidroxi-heptadecatrienoico (12-HHT) e malondialdeído (MDA), que medeia danos ao DNA.
  Referências relacionadas: PMID:11097184 PMID:11297515 PMID:22735388 PMID:9873013
• Apresenta atividade desidratase sobre o (15S)-hidroperoxi-(5Z,8Z,11Z,13E)-eicosatetraenoato (15(S)-HPETE), produzindo 15-KETE e 15-HETE.
  Referências relacionadas: PMID:17459323
• Está localizada principalmente na membrana do retículo endoplasmático, garantindo o acoplamento eficiente com as prostaglandina H sintases a montante.
• É altamente expressa nas plaquetas; também é encontrada nos pulmões, rins, baço, macrófagos e fibroblastos pulmonares.
• Contém cofatores heme e ferro e é classificada como mono-oxigenase, isomerase e liase. Múltiplas isoformas surgem por meio de splicing alternativo.
• Variantes genéticas em TBXAS1 estão associadas a distúrbios hemorrágicos, como a displasia hematodiafisária de Ghosal (BDPLT14), destacando seu papel na hemostasia.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• Para Western blotting (WB), espera-se uma banda em torno de 61 kDa em lisados de plaquetas ou tecido pulmonar humanos e de camundongo. Use condições redutoras e valide com controles positivos apropriados (por exemplo, plasma rico em plaquetas).
• O imunógeno abrange os aminoácidos 355–534, correspondentes a uma região C-terminal; portanto, o anticorpo pode reconhecer a proteína de comprimento completo e algumas isoformas truncadas.
• No ELISA, o anticorpo pode ser usado para captura ou detecção do antígeno; recomenda-se combiná-lo com um segundo anticorpo contra um epítopo distinto para ensaios do tipo sanduíche. Otimize as concentrações na matriz da amostra.
• Devido à alta expressão do alvo nas plaquetas, evite ciclos excessivos de congelamento e descongelamento das amostras de plaquetas para preservar a integridade do epítopo.

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