Anticorpo Monoclonal de Coelho Peroxidase Tireoidiana para IHC-P/ELISA - P07202

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Peroxidase Tireoidiana

• A peroxidase tireoidiana (TPO) é uma enzima chave na biossíntese de hormônios tireoidianos, catalisando a iodação e o acoplamento de tirosinas hormonogênicas na tireoglobulina para produzir os hormônios ativos T3 e T4.
• A TPO é uma glicoproteína transmembrana localizada na membrana apical das células foliculares da tireoide, orientada com seu domínio enzimático voltado para o lúmen folicular.
• A proteína contém um grupo prostético hemo essencial para sua atividade de peroxidase, juntamente com sítios de ligação de cálcio e ferro, ligações dissulfeto e domínios semelhantes ao EGF que contribuem para a estabilidade estrutural.
• Múltiplas variantes de splicing da TPO foram identificadas, algumas das quais podem produzir isoformas secretadas ou localizadas de forma diferente, embora a forma de membrana de comprimento total seja predominante.
• A TPO é um importante autoantígeno em doenças autoimunes da tireoide, como a tireoidite de Hashimoto e a doença de Graves, e mutações no gene TPO podem causar hipotireoidismo congênito.
• O registro da UniProt classifica a TPO como uma peroxidase, oxirredutase e proteína de biossíntese de hormônios tireoidianos, com evidência em nível de proteína a partir de identificação por proteômica.
• Modificações pós-traducionais incluem N-glicosilação, que é importante para o dobramento adequado e a atividade enzimática.
• A expressão da TPO é amplamente restrita à glândula tireoide, tornando-a um marcador específico para o tecido tireoidiano em imuno-histoquímica.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno foi desenhado contra a região N-terminal (aminoácidos 1-100) da TPO humana, o que pode direcionar um epítopo conservado entre humanos, camundongos e ratos.
• Para IHC-P, métodos de recuperação de antígeno, como a recuperação de epítopo induzida por calor em tampão citrato (pH 6,0), são frequentemente benéficos para proteínas de membrana; valide em seu tipo específico de tecido.
• Em ELISA, use TPO recombinante ou frações purificadas de tireoglobulina como antígeno de revestimento; considere o bloqueio com leite desnatado ou BSA para reduzir o ruído de fundo.
• Como o anticorpo é monoclonal, espera-se consistência de lote para lote; no entanto, as diluições de trabalho ideais devem ser determinadas experimentalmente para cada aplicação e sistema de amostra.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato foi confirmada, permitindo o uso em modelos de pesquisa tireoidiana em roedores; verifique por western blot ou IHC em tecidos relevantes.

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