TP53BP1 pAb de Coelho - Q12888

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização de TP53BP1

• TP53BP1 (53BP1) é uma proteína de reparo de quebras duplas de fita (DSB) que desempenha um papel central na sinalização de danos ao DNA, manutenção de telômeros e recombinação de troca de classe (CSR) de imunoglobulinas. Referências relacionadas: PMID:12364621, PMID:17190600, PMID:21144835
• Ela promove o reparo de DSBs mediado pela junção de extremidades não homólogas (NHEJ) e contraria especificamente a recombinação homóloga dependente de BRCA1, preservando a estabilidade do genoma. Referências relacionadas: PMID:22553214, PMID:23333306, PMID:23727112
• Após o dano ao DNA, a fosforilação de 53BP1 mediada por ATM desencadeia sua interação com RIF1 e a liberação da proteína inibitória TIRR/NUDT16L1, permitindo o recrutamento aos locais de dano. Referências relacionadas: PMID:28241136
• 53BP1 é direcionada aos DSBs por meio do reconhecimento bivalente de marcas histônicas: H2A monoubiquitinada em Lys-15 (H2AK15Ub) e H4 dimetilada em Lys-20 (H4K20me2). Referências relacionadas: PMID:17190600, PMID:23760478, PMID:27153538
• Necessário para a CSR durante a formação de anticorpos, participa do reparo e da orientação correta das extremidades de DNA quebrado. Referências relacionadas: PMID:23345425
• 53BP1 também promove a NHEJ de telômeros disfuncionais por meio da interação com PAXIP1, contribuindo para a capa telomérica. Referências relacionadas: PMID:23727112
• A localização subcelular é predominantemente nuclear, com associação aos cromossomos e enriquecimento em centrômeros e cinetócoros.
• A proteína sofre extensas modificações pós-traducionais, incluindo fosforilação, metilação, formação de ligação isopeptídica e conjugação com proteínas do tipo ubiquitina.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno é uma proteína recombinante que abrange os aminoácidos 895-1031 da TP53BP1 humana. Ele é projetado para atingir a região central e pode detectar a forma completa, bem como certas isoformas de splicing; os pesquisadores devem verificar a especificidade em seu sistema modelo.
• No Western blot, o peso molecular previsto é de ~214 kDa. Devido ao grande tamanho, considere usar um gel de baixa porcentagem e condições de transferência estendidas para uma detecção ideal.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), métodos padrão de recuperação de antígeno são recomendados; experimentos de titulação podem ajudar a estabelecer a diluição de trabalho ideal.
• A reatividade cruzada é relatada para humano, camundongo e rato. Verifique o desempenho em outras espécies antes do uso.
• Este anticorpo é adequado para ELISA; a compatibilidade para pareamento em ensaio sanduíche deve ser avaliada empiricamente se usado em combinação com outros anticorpos.
• Como anticorpo policlonal, pode ocorrer variabilidade entre lotes; inclua controles positivos e negativos apropriados em cada experimento.

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