TRIM5 pAb de coelho - Q9C035

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização de TRIM5

• TRIM5, também conhecido como RNF88 ou proteína 88 contendo o dedo RING, é membro da família de proteínas com motivo tripartido (TRIM), caracterizada pelos domínios RING, B-box e coiled-coil. Atua como uma ligase E3 de ubiquitina envolvida na imunidade inata antiviral.
• Atua como um fator de restrição específico do capsídeo, bloqueando a infecção por retrovírus não adaptados ao hospedeiro (incluindo N-MLV, EIAV, SIVmac, FIV e BIV) no início do ciclo de vida, após a entrada viral, mas antes da transcrição reversa. Também funciona como um receptor de reconhecimento de padrões que ativa a sinalização da imunidade inata ao se ligar à rede do capsídeo retroviral, desencadeando sua atividade de ligase E3, gerando cadeias de poliubiquitina ligadas à Lys-63 por meio do complexo UBE2V1-UBE2N e, em última instância, levando à indução de genes responsivos a NF-kB e MAPK. Referências relacionadas: PMID:17156811
• Regula a autofagia ao liberar BECN1 de seus inibidores BCL2 e TAB2, além de atuar como um receptor de autofagia seletiva que direciona a proteína p24 do capsídeo do HIV-1 para destruição autofágica. Referências relacionadas: PMID:25127057
• Localiza-se tanto no citoplasma quanto no núcleo, permitindo interceptar capsídeos virais que entram no citoplasma e possivelmente modular a expressão de genes do hospedeiro no núcleo.
• Contém modificações pós-traducionais e características estruturais importantes: acetilação, fosforilação e domínios RING e B-box de ligação ao zinco, essenciais para sua atividade de ligase E3 e função antiviral.
• Apresenta splicing alternativo, produzindo isoformas como TRIM5alpha (a forma antiviral de comprimento total) e outras com especificidades antivirais e padrões de expressão distintos.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 100–200 de TRIM5 humano (NP_149083.2). Devido à natureza policlonal, o anticorpo pode reconhecer várias variantes e isoformas de TRIM5; confirme a especificidade na espécie e no tipo celular-alvo.
• Para Western blot, espera-se uma banda predominante em aproximadamente 56 kDa, correspondente a TRIM5alpha, em lisados humanos, de camundongo e de rato. Otimize a preparação das amostras e os controles de carregamento para distinguir essa banda de outras proteínas TRIM com pesos moleculares semelhantes.
• No ELISA, o anticorpo pode ser utilizado como reagente de captura ou de detecção. Titule cuidadosamente e valide a linearidade e a sensibilidade com proteína TRIM5 recombinante ou lisados celulares que expressem o alvo.

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