Anticorpo Monoclonal de Coelho TriMetil-Histona H3-K27 (Q16695/P68431) para ChIP, CUT&Tag, WB

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TriMetil-Histona H3 (K27)

A histona H3 é uma proteína histona central que, juntamente com H2A, H2B e H4, forma o nucleossoma, a unidade repetitiva fundamental da cromatina. Como componente central do nucleossoma, a histona H3 envolve o DNA, condensando-o em cromatina e regulando o acesso à informação genética subjacente. Este papel estrutural é crítico para manter a estabilidade dos cromossomas e controlar processos nucleares-chave, incluindo transcrição, replicação do DNA e reparação do DNA.

A histona H3 está sujeita a uma vasta gama de modificações pós-traducionais (MPT) na sua cauda N-terminal flexível, incluindo metilação, acetilação, fosforilação e citrulinização. Estas modificações, frequentemente referidas como o "código das histonas", regulam dinamicamente a estrutura e função da cromatina. A trimetilação específica da lisina 27 (H3K27me3) é uma marca repressiva bem caracterizada que é depositada pelo complexo repressivo polycomb 2 (PRC2) e está associada ao silenciamento génico, inativação do cromossoma X e regulação do desenvolvimento.

A variante H3.1 (UniProt P68431) é amplamente expressa e constitui a maior parte da histona H3 em células somáticas, enquanto a H3.1t (H3-4, UniProt Q16695) é expressa principalmente em células testiculares. Ambas as variantes localizam-se no núcleo e nos cromossomas, onde participam na montagem do nucleossoma e na organização da cromatina.

Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Informação sobre o imunogénio: O anticorpo foi produzido contra um péptido trimetilado sintético que abrange a lisina 27 (K27) da Histona H3 humana. Este desenho garante o reconhecimento específico da modificação H3K27me3. Para aplicações que requerem discriminação entre diferentes estados de metilação, valide a especificidade usando ensaios de competição com péptidos.
• Western Blot (WB): O peso molecular previsto da histona H3 é de aproximadamente 15 kDa. Utilize percentagens de gel apropriadas (por exemplo, SDS-PAGE a 15%) para uma separação ótima. Inclua controlos positivos e negativos (por exemplo, células tratadas com inibidores de EZH2 para reduzir H3K27me3) para confirmar a especificidade da banda.
• ChIP e CUT&Tag: Este anticorpo é adequado para ensaios de imunoprecipitação da cromatina e CUT&Tag para mapear a distribuição de H3K27me3 em todo o genoma ou em loci específicos. Otimize a concentração de anticorpo para cada quantidade de entrada de cromatina e inclua controlos IgG apropriados.
• ELISA: Utilize o péptido imunizante como controlo positivo para gerar curvas padrão. Considere que o anticorpo pode reagir de forma cruzada com péptidos contendo motivos trimetilados semelhantes; valide no sistema de amostra relevante.

CamelBio: A Sua Ponte de Abastecimento Tudo-em-Um

Na CamelBio, compreendemos o papel crítico de matérias-primas de alta qualidade em aplicações de diagnóstico e investigação. Este Anticorpo Monoclonal de Coelho TriMetil-Histona H3-K27 exemplifica o nosso compromisso em fornecer anticorpos validados para estudos epigenéticos. Quer necessite de reagentes auxiliares a granel, pares de anticorpos otimizados para desenvolvimento de IVD ou assistência na procura de alvos raros, a CamelBio oferece soluções de fornecimento abrangentes para acelerar o seu projeto desde o conceito até à clínica.