Anticorpo Policlonal de Coelho TriMethyl-Histone H3-K27 (Q16695/P68431) para WB, ChIP, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, a unidade fundamental repetitiva da cromatina. Os nucleossomos enrolam e compactam o DNA em cromatina, limitando a acessibilidade do DNA às máquinas celulares que requerem o DNA como molde. Assim, as histonas desempenham um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é regulada por meio de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais das histonas, também chamado de código de histonas, e remodelagem de nucleossomos. Referências relacionadas: UniProt P68431

A histona H3 localiza-se no núcleo e está associada aos cromossomos durante todo o ciclo celular. Referências relacionadas: UniProt P68431

Múltiplas isoformas da histona H3 são codificadas por uma família de genes. A H3.1 canônica (codificada por vários genes H3C, SWISS P68431) é amplamente expressa, enquanto a H3.1t (Q16695, também conhecida como H3t ou H3/g) é expressa especificamente em células testiculares. Referências relacionadas: UniProt Q16695

A trimetilação na lisina 27 (K27) da histona H3 é uma marca epigenética crítica. Nas sequências canônicas H3.1 e H3.1t, isso corresponde à posição 28. Esta modificação está associada à repressão transcricional e é regulada dinamicamente por metiltransferases e desmetilases. Referências relacionadas: PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16627869

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético que abrange os aminoácidos 1-100 da histona H3 humana. Dada a alta conservação da histona H3 entre as espécies, prevê-se que este anticorpo detecte uma ampla gama de espécies de mamíferos (humanos, camundongos, ratos e outros).
• Este anticorpo foi projetado para reconhecer especificamente a K27 trimetilada. Ao realizar aplicações como Western blotting ou ChIP, considere incluir controles apropriados (por exemplo, competição com peptídeo não metilado ou lisado de células com estado de metilação alterado) para confirmar a especificidade.
• Para ensaios de ChIP, otimize o cisalhamento da cromatina e a concentração do anticorpo para garantir o enriquecimento específico de regiões de cromatina trimetiladas em K27.
• Em imunofluorescência ou imuno-histoquímica, as condições de fixação e permeabilização podem afetar a acessibilidade do epítopo. Valide no sistema de amostra relevante.

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