Anticorpo monoclonal de coelho TriMetil-Histona H3-K36 (K36me3), Q16695/P68431 – WB, ChIP-seq, IHC-P

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3

• A Histona H3 é um componente central do nucleossomo, envolvendo o DNA em cromatina e desempenhando um papel fundamental na regulação da transcrição, reparo de DNA, replicação e estabilidade cromossômica. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431
• A proteína localiza-se no núcleo e nos cromossomos. Referências relacionadas: UniProtKB Q16695, UniProtKB P68431
• A Histona H3.1t (codificada por H3-4/HIST3H3, acesso Q16695) é específica do testículo, enquanto a H3.1 canônica (P68431) é expressa de forma ubíqua.
• A cauda N-terminal da histona H3 está sujeita a extensas modificações pós-traducionais (MPTs), incluindo metilação, acetilação, fosforilação e outras, que constituem o "código das histonas" que regula a dinâmica da cromatina. Referências relacionadas: PMID:16267050, PMID:17194708
• A metilação de resíduos de lisina, como a K36, está associada ao alongamento ativo da transcrição e é frequentemente enriquecida nos corpos dos genes. A trimetilação em K36 (H3K36me3) serve como uma plataforma de ligação para várias proteínas leitoras envolvidas na transcrição e splicing. Referências relacionadas: PMID:16267050
• Este anticorpo, produzido contra um peptídeo sintético trimetilado em torno de K36, reconhece especificamente a modificação K36me3, permitindo o estudo detalhado desta marca epigenética.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno para este anticorpo é um peptídeo sintético trimetilado correspondente aos resíduos em torno de K36 da Histona H3 humana. Ao realizar ensaios, considere incluir um peptídeo não metilado ou um peptídeo com um estado de metilação diferente como controle negativo para confirmar a especificidade.
• Para Western blot (WB), histonas extraídas com ácido ou lisados celulares totais são tipos de amostra adequados. O tamanho esperado da banda é ~15 kDa. Otimize a carga e a diluição do anticorpo para o seu sistema específico.
• Este anticorpo é adequado para ChIP e ChIP-seq; siga os protocolos padrão de preparação e fragmentação de cromatina e considere o uso de controles spike-in para normalização.
• A reatividade cruzada é prevista para uma ampla gama de espécies além de humano, camundongo e rato, devido à alta conservação da sequência. No entanto, a validação na espécie pretendida é recomendada.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), a recuperação do antígeno e as condições de detecção podem exigir otimização.

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