Anticorpo Policlonado de Coelho TriMetil-Histona H3-K36 para Pesquisa Epigenética (Q16695/P68431)

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H3.1t e H3.1

A histona H3.1 e sua variante específica de testículo H3.1t são componentes centrais do nucleossomo, a unidade fundamental de repetição da cromatina. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA, regulando o acesso para a maquinaria de transcrição, replicação e reparo. O cenário dinâmico de modificações pós-traducionais (PTM) das histonas, frequentemente chamado de "código da histona", governa as funções genômicas e influencia, em última análise, a identidade e estabilidade celular.

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Tanto H3.1 quanto H3.1t se localizam no núcleo e são parte integrante da estrutura cromossômica. Enquanto H3.1 é expressa de forma ubíqua em todas as células somáticas, H3.1t é expressa seletivamente no testículo, sugerindo um papel especializado na remodelação da cromatina durante a espermatogênese.

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A trimetilação da lisina 36 (H3K36me3) é uma marca de histona proeminente associada a corpos de genes ativamente transcritos, reparo de DNA e recombinação. Essa modificação é depositada pela metiltransferase SETD2 e reconhecida por proteínas leitoras que medeiam efeitos downstream no splicing e na compactação da cromatina.

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A desregulação da metilação de H3K36 está associada a vários cânceres e distúrbios do desenvolvimento, o que torna esse alvo fundamental para a pesquisa epigenética e aplicações diagnósticas.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Para Western blot (WB), o anticorpo detecta uma banda de aproximadamente 15 kDa. Considere usar lisados de células totais ou extratos enriquecidos de histonas de células humanas, de camundongo ou de rato.
• Ao realizar ChIP ou ChIP-seq, titule a quantidade de anticorpo e valide o enriquecimento dos loci alvo (por exemplo, genes ativamente transcritos) junto com regiões controle positivas e negativas.
• Para imunofluorescência (IF/ICC) e imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de fixação e recuperação de antígeno podem precisar de otimização; teste os protocolos de permeabilidade e bloqueio para sua amostra específica.
• A ampla reatividade cruzada entre espécies (humano, camundongo, rato e ampla faixa prevista) sugere que esse anticorpo pode reconhecer epítopos conservados, mas sempre verifique a especificidade em espécies não validadas.
• Como reagente específico para metilação, a reatividade cruzada com H3 não modificado ou com modificações diferentes deve ser descartada usando competição com peptídeo adequada ou modelos de knockout.

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