mAb de Coelho contra TriMetil-Histona H3-K4 - Q16695/P68431 - Anticorpo para WB, IHC-P, IF

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da TriMetil-Histona H3-K4

A Histona H3 é um componente central do nucleossomo. Os nucleossomos envolvem e compactam o DNA em cromatina, desempenhando um papel central na regulação da transcrição, reparo do DNA, replicação do DNA e estabilidade cromossômica. a acessibilidade do DNA é regulada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais, conhecido como código das histonas, e pela remodelação dos nucleossomos.
Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

A trimetilação da histona H3 na lisina 4 (H3K4me3) é uma marca epigenética associada a promotores de genes ativos e início da transcrição. Essa modificação é catalisada por histona metiltransferases e é reconhecida por diversas proteínas de ligação à cromatina.
Referências relacionadas: PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

A Histona H3 está predominantemente localizada no núcleo e se associa aos cromossomos durante a divisão celular. A variante H3.1t (Q16695) é expressa em células testiculares, enquanto a H3.1 canônica (P68431) é expressa de forma ubíqua.
Referências relacionadas: UniProt Q16695, UniProt P68431

Múltiplas modificações pós-traducionais na histona H3, incluindo metilação, acetilação, fosforilação e citrulinação, regulam dinamicamente a estrutura e a função da cromatina. O sítio H3K4 sofre especificamente mono-, di- e trimetilação, sendo a trimetilação um marcador da transcrição ativa.
Referências relacionadas: PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para gerar este anticorpo é um peptídeo sintético correspondente à região K4 trimetilada da histona H3 humana. Isso garante o reconhecimento específico da marca H3K4me3.
• Para Western blotting (WB), pode ser detectada uma banda de aproximadamente 15 kDa, compatível com o peso molecular da histona H3. Este anticorpo também é recomendado para aplicações de IHC-P, IF/ICC, ELISA e ChIP. Pesquisadores devem otimizar a diluição e as condições do ensaio em seu sistema experimental.
• Prevê-se que o anticorpo tenha reatividade cruzada com camundongo e rato devido à alta conservação da sequência da região H3K4; recomenda-se uma validação preliminar nas espécies relevantes.
• Ao realizar ChIP, foi relatado que o anticorpo enriquece as sequências de DNA associadas a H3K4me3; considere-o para estudos de regiões promotoras e genes ativos.
• Como qualquer anticorpo específico para modificações pós-traducionais, confirme a especificidade usando controles adequados (ex.: competição por peptídeos, knockout/knockdown genético ou tratamento com inibidores de histonas modificadoras de enzimas).

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