Anticorpo Policlonal de Coelho TriMetil-Histona H3 (K9) - Q16695/P68431 | WB, ChIP, IHC, ELISA

A histona H3 é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o ADN em cromatina para limitar a acessibilidade do ADN. Esta compactação impõe um papel central às histonas na regulação da transcrição, reparo do ADN, replicação do ADN e estabilidade cromossómica. A acessibilidade do ADN é regulada dinamicamente através de um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (o "código das histonas") e remodelação de nucleossomos. Referências relacionadas: UniProt Q16695 / P68431

A histona H3 humana existe como múltiplas variantes, incluindo a canónica dependente de replicação H3.1 (codificada por vários genes como H3C1, H3C2, etc.; UniProt P68431) e a específica do testículo H3.1t (gene H3-4; UniProt Q16695). Ambas as variantes partilham uma cauda N-terminal altamente conservada que está sujeita a extensas modificações pós-traducionais. Referências relacionadas: UniProt Q16695 / P68431

A trimetilação da lisina 9 (H3K9me3, correspondente à posição 10 na sequência completa do UniProt) é uma modificação marcador frequentemente associada à formação de heterocromatina constitutiva, silenciamento transcricional e ao recrutamento de HP1 (proteína heterocromatina 1). Esta modificação foi documentada no UniProt com extensa evidência experimental. Referências relacionadas: PMID:11242053, PMID:16185088, PMID:16267050, PMID:16457588, PMID:17194708

Tanto a H3.1 como a H3.1t localizam-se no núcleo e associam-se aos cromossomas. Embora a H3.1 seja amplamente expressa, a expressão da H3.1t está restrita a células testiculares. Referências relacionadas: UniProt Q16695 / P68431

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunogénio é um peptídeo sintético contendo K9 trimetilada; para Western blot, considere usar lisados de células inteiras ou extratos enriquecidos em histonas e validar a banda esperada em ~15 kDa.
• Para imunoprecipitação de cromatina (ChIP), desenhe primers de qPCR para loci conhecidos enriquecidos com H3K9me3 (por exemplo, repetições pericentroméricas) como controlos positivos; inclua uma competição com peptídeo não modificado para verificar a especificidade do anticorpo.
• Para imuno-histoquímica (IHC‑P) e imunofluorescência (IF/ICC), otimize as condições de fixação, permeabilização e recuperação de antigénio para a sua amostra; são recomendados tecidos de controlo positivos e negativos (por exemplo, testículo vs. não‑testículo).
• Prevê-se que o anticorpo tenha reatividade cruzada com uma vasta gama de espécies para além do humano, rato e rato; portanto, é aconselhada a validação no sistema de amostra relevante.

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