Anticorpo Policlonal de Coelho TrkA para WB, IHC-P, ELISA - P04629

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do TrkA/NTRK1

• O TrkA (Receptor de alta afinidade do fator de crescimento nervoso) é uma tirosina quinase de receptor que serve como o receptor primário para o fator de crescimento nervoso (NGF). Após a ligação do NGF, o TrkA sofre dimerização e autofosforilação, iniciando vias de sinalização que controlam a sobrevivência, diferenciação e proliferação neuronal durante o desenvolvimento do sistema nervoso. Referências relacionadas: PMID:1281417, PMID:15488758, PMID:17196528
• As cascatas de sinalização a jusante incluem GRB2-Ras-MAPK (diferenciação e sobrevivência celular), PI3K-AKT (sobrevivência) e PLCG1-NF-kappa-B (transcrição de genes de sobrevivência).
• O TrkA localiza-se na membrana celular e é internalizado em endossomos iniciais, tardios e de reciclagem após a ativação.
• Existem múltiplas isoformas: TrkA-I é amplamente expressa em tecidos não neuronais, TrkA-II é específica de neurônios e TrkA-III é expressa em células-tronco/progenitoras neurais. O TrkA-III promove a angiogênese e possui atividade oncogênica quando superexpresso.
• O TrkA é um proto-oncogene sujeito a autofosforilação e ubiquitinação. Apresenta domínios do tipo imunoglobulina, repetições ricas em leucina e um domínio de tirosina quinase.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno (aa 700-796) reside na região intracelular do TrkA, o que pode auxiliar na detecção da porção C-terminal do receptor. Considere esta localização do epítopo ao planejar protocolos experimentais.
• Para Western blotting, condições desnaturantes e redutoras são tipicamente adequadas. Valide com controles positivos como lisatos celulares de PC12 (rato) ou SH-SY5Y (humano), observando uma banda em torno de 87 kDa.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), as etapas de recuperação de antígeno podem aumentar a detecção. Teste em secções de tecido neuronal onde a expressão de TrkA é esperada.
• A reatividade cruzada do anticorpo com ortólogos humanos, de camundongo e de rato permite o uso em diversos modelos pré-clínicos; confirme a especificidade no seu sistema modelo.
• Para aplicações de ELISA, considere o uso de proteínas TrkA recombinantes ou lisatos celulares para a otimização do ensaio.

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