Anticorpo policlonal de coelho anti-TrkA para WB, IHC-P, ELISA - P04629

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização do TrkA

• O TrkA (receptor de alta afinidade do fator de crescimento nervoso) é um receptor tirosina-quinase codificado pelo gene NTRK1; também é conhecido como receptor de tirosina-quinase neurotrófico tipo 1, proteína tirosina-quinase transformadora TRK1 e gp140trk. Referências relacionadas: PMID:1281417 PMID:15488758 PMID:17196528
• Desempenha um papel crítico no desenvolvimento e na maturação dos sistemas nervosos central e periférico, regulando a proliferação, a diferenciação e a sobrevivência dos neurônios simpáticos e sensoriais por meio da ligação e ativação pelo ligante NGF (PubMed:1281417, PubMed:15488758, PubMed:17196528). Referências relacionadas: PMID:1281417 PMID:15488758 PMID:17196528
• Após a ligação do NGF, o TrkA dimeriza, sofre autofosforilação e ativa cascatas de sinalização a jusante, incluindo GRB2-Ras-MAPK (diferenciação/sobrevivência), PLCG1-NF-κB (sobrevivência) e Ras-PI3K-AKT1 (sobrevivência) (PubMed:1281417). Referências relacionadas: PMID:1281417
• O splicing alternativo produz várias isoformas: TrkA-I (não neuronal), TrkA-II (neuronal) e TrkA-III (células-tronco/progenitoras neurais da crista); TrkA-III não possui ligação ao NGF e apresenta atividade oncogênica.
• O TrkA localiza-se na membrana celular e trafega dinamicamente pelas membranas dos endossomos iniciais, tardios e de reciclagem após a ativação.
• As principais características estruturais incluem repetições ricas em leucina, domínios de imunoglobulina, uma hélice transmembrana e um domínio tirosina-quinase; a proteína sofre fosforilação e ubiquitinação.
• Embora seja principalmente neurotrófico, o TrkA também medeia a angiogênese e pode atuar como oncogene em contextos tumorais quando expresso de forma aberrante.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 1–280, incluindo o domínio extracelular de ligação ao ligante; o anticorpo policlonal resultante pode detectar várias isoformas. Confirme a especificidade da isoforma no seu tipo de célula/tecido por western blot.
• Para western blot, o peso molecular previsto é de aproximadamente 87 kDa (UniProt: 87,5 kDa); observe que a glicosilação ou outras modificações podem causar deslocamentos das bandas.
• Para IHC-P, pode ser necessário otimizar as condições de recuperação antigênica; valide utilizando tecidos de controle positivo conhecidos (por exemplo, cérebro e gânglios da raiz dorsal).
• Por se tratar de um anticorpo policlonal, é possível haver variação entre lotes; recomenda-se realizar testes-piloto com as amostras-alvo.

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