Anticorpo Policlonal de Coelho UBE2K para WB, ELISA - P61086

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UBE2K

• UBE2K (Enzima Ubiquitina-Conjugante E2 K, também conhecida como HIP2, E2-25K) é uma enzima E2 que aceita ubiquitina do complexo E1 e catalisa sua ligação covalente a proteínas substrato, desempenhando um papel central no sistema ubiquitina-proteassoma.
• Catalisa a síntese de cadeias de poliubiquitina ligadas por Lis-48, que tipicamente direcionam proteínas para degradação pelo proteassoma. Esta enzima media a degradação seletiva de proteínas de vida curta e anormais, incluindo as envolvidas na degradação associada ao retículo endoplasmático (ERAD).
• UBE2K ubiquitina a huntingtina, a proteína implicada na doença de Huntington, e contribui para a formação de células espumosas promovendo a degradação da p53, suprimindo assim a apoptose em macrófagos carregados de lipídios.
• Em infecções virais, a UBE2K é sequestrada para a degradação da cadeia pesada do MHC classe I e para a degradação dependente de HPV E7 da RB1, destacando seu papel na evasão imune e na transformação oncogênica.
• A proteína está localizada principalmente no citoplasma, consistente com seu papel em eventos de ubiquitinação citosólica.
• A UBE2K sofre modificações pós-traducionais, incluindo acetilação e fosforilação, que podem regular sua atividade; o splicing alternativo gera isoformas adicionais.
• É expressa de forma ubíqua em tecidos humanos, com alta expressão no cérebro, particularmente no córtex e no estriado, regiões afetadas em distúrbios neurodegenerativos.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo sintético abrangendo os aminoácidos 1-100 da UBE2K humana, direcionando a região N-terminal. Espere reatividade contra a proteína de comprimento total (22 kDa) no Western blot.
• Para Western blot, titule o anticorpo entre as diluições de 1:500 e 1:2000 e otimize com base na sua amostra e sistema de detecção. Use controles positivos (ex.: lisado de células HeLa) e negativos apropriados.
• Este anticorpo é validado para ELISA; para ELISA indireto, determine empiricamente a concentração ótima do antígeno de revestimento e a diluição do anticorpo.
• Como a reatividade cruzada é confirmada apenas para UBE2K humana, valide o anticorpo em outras espécies, se necessário, pois a homologia de sequência pode permitir reatividade cruzada.
• Anticorpos policlonais podem apresentar variabilidade entre lotes; inclua padrões de referência internos para reprodutibilidade.

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