Anticorpo policlonal de coelho anti-UBE2W para WB, ELISA - Q96B02

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da UBE2W

• UBE2W (também conhecida como UBC-16, UBC16) é uma enzima E2 conjugadora de ubiquitina que atua aceitando ubiquitina do complexo E1 e catalisando sua ligação covalente a proteínas substrato.
  Referências relacionadas: PMID:20061386, PMID:21229326
• Ela monoubiquitina especificamente a extremidade N-terminal de vários substratos, incluindo ATXN3, MAPT/TAU, POLR2H/RPB8 e STUB1/CHIP, reconhecendo os átomos da cadeia principal das extremidades N-terminais desordenadas.
  Referências relacionadas: PMID:23560854, PMID:23696636, PMID:25436519
• UBE2W está envolvida na degradação de substratos mal dobrados de chaperonas, mediando a monoubiquitinação de STUB1/CHIP, o que recruta ATXN3 e restringe o comprimento das cadeias de ubiquitina ligadas aos substratos de STUB1/CHIP.
• Ela atua como uma enzima E2 específica para o complexo da anemia de Fanconi após a irradiação UV, associando-se a FANCL para monoubiquitinar FANCD2, uma etapa crítica no reparo de danos ao DNA.
  Referências relacionadas: PMID:19111657, PMID:21229326
• UBE2W pode catalisar a poliubiquitinação ligada a 'Lys-11' in vitro e pode funcionar mesmo na ausência de ligases E3 ativas, embora em uma taxa mais lenta.
  Referências relacionadas: PMID:25436519
• Estudos de localização subcelular indicam que UBE2W é encontrada predominantemente no núcleo.
• Ela é amplamente expressa nos tecidos, com maior expressão no cérebro, fígado, pâncreas e coração.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno utilizado é uma proteína de fusão recombinante correspondente aos aminoácidos 40-110 de UBE2W humana, o que pode proporcionar especificidade para o alvo humano; foi observada reatividade cruzada com camundongo, sugerindo o possível reconhecimento de epítopos conservados.
• Para a análise por Western blot, espera-se uma banda em torno de 17 kDa com base no peso molecular previsto de UBE2W; controles positivos pré-validados, como lisados de células HeLa ou HEK293, podem ser adequados devido à expressão ubíqua de UBE2W.
• Em aplicações de ELISA, considere utilizar UBE2W recombinante como antígeno de captura e titule o anticorpo para determinar as diluições de trabalho ideais.
• Devido à localização nuclear de UBE2W, protocolos eficazes de extração nuclear podem ser necessários para uma detecção ideal em Western blots de fracionamento celular.

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