UBE3A PAb de Coelho - Q05086

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UBE3A

• O gene UBE3A codifica a ligase E3 de proteína ubiquitina do tipo HECT E6AP, que aceita a ubiquitina de uma enzima conjugadora E2 e a transfere para proteínas substrato. Referências relacionadas: PMID:10373495, PMID:16772533, PMID:19204938
• Substratos chave incluem BMAL1, ARC, LAMTOR1, RAD23A, RAD23B, MCM7, anexina A1, o supressor tumoral PML e o regulador do ciclo celular CDKN1B, ligando a UBE3A ao ritmo circadiano, remodelação sináptica, replicação do DNA e supressão tumoral. Referências relacionadas: PMID:10373495, PMID:19204938, PMID:19325566
• No relógio circadiano, a UBE3A ubiquitina a BMAL1, direcionando-a para degradação proteassomal e regulando assim o oscilador circadiano central. Referências relacionadas: PMID:24728990
• Em neurônios, a UBE3A controla o desenvolvimento sináptico ao mediar a ubiquitinação e degradação de ARC e LAMTOR1, limitando assim a sinalização de mTORC1 e a remodelação sináptica dependente de atividade (Por similaridade).
• A UBE3A atua como um coativador transcricional do receptor de progesterona PGR, sinergizando com WBP2 para potencializar a transcrição mediada por PGR. Referências relacionadas: PMID:16772533
• A proteína se localiza tanto no citoplasma quanto no núcleo, o que é consistente com seus papéis no controle de qualidade proteico e na regulação transcricional.
• Durante a infecção pelo papilomavírus humano de alto risco (HPV), a UBE3A coopera com a proteína viral E6 para ubiquitinar e degradar o supressor tumoral p53, contribuindo para a transformação celular.
• A UBE3A contém um domínio de dedo de zinco e é regulada por fosforilação, como indicado pelas palavras-chave curadas do UniProt.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno abrange os aminoácidos 300–590, uma região central conservada entre a UBE3A de humanos, camundongos e ratos, o que sustenta a reatividade cruzada observada.
• Para western blotting, o peso molecular esperado é de ~101 kDa; considere usar um lisado de célula total de uma linhagem celular conhecida por expressar UBE3A (ex: HEK293, HeLa) como controle positivo.
• Para IHC-P e IF/ICC, valide o padrão de coloração no seu sistema de tecido ou celular; a localização relatada inclui ambos os compartimentos citoplasmático e nuclear.
• O ELISA pode ser usado para detecção quantitativa; considere o pareamento com um par de anticorpos compatível para ensaios de captura-detecção.
• Sempre faça a titulação do anticorpo no seu próprio sistema experimental, pois as diluições de trabalho ideais dependem do tipo de amostra e do método de detecção.

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