Anticorpo Policlonal de Coelho Ubiquityl-Histona H2A-K119 (P04908/P0C0S8) para WB e ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H2A Tipo 1

Função da Histona H2A

A histona H2A é um componente central do nucleossomo, enrolando e compactando o DNA em cromatina. Este papel estrutural limita a acessibilidade do DNA e, portanto, regula centralmente a transcrição, reparo de DNA, replicação de DNA e estabilidade cromossômica. A acessibilidade do DNA é modulada por um conjunto complexo de modificações pós-traducionais (PTMs) conhecidas como "código de histonas" e pelo remodelamento de nucleossomos.

Localização Subcelular

A histona H2A localiza-se principalmente no núcleo e associa-se aos cromossomos.

Modificações Pós-Traducionais

A histona H2A sofre extensas PTMs, incluindo acetilação, fosforilação, citrulinização e ubiquitinação. Modificações anotadas específicas incluem:

• Acetilação N-terminal em Ser-2.
• Fosforilação em Ser-2 por RPS6KA5.
• Citrulinização em Arg-4.
• Em Lys-119, o resíduo alvo deste anticorpo, foram identificadas múltiplas acilações: hidroxiisobutirilação, beta‑hidroxibutirilação, crotonilação e glutarilação. A palavra-chave "Conjugação Ubl" no UniProt suporta que a ubiquitinação também ocorre neste local.

Referências relacionadas: PMID:11709551, PMID:15823041, PMID:16457589, PMID:15010469, PMID:24681537, PMID:27105115, PMID:21925322, PMID:31542297

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo ubiquitinilado sintético em torno da K119 da HIST1H2AB humana (UniProt P04908/P0C0S8). Este design sugere especificidade para a forma ubiquitilada; verifique a especificidade usando controles apropriados (por exemplo, comparação com peptídeo não modificado ou lisados de células com ubiquitinação modulada).
• Para Western blot (WB), considere extrair histonas usando protocolos de extração ácida para enriquecer proteínas histonas. O peso molecular não modificado previsto é de aproximadamente 14 kDa; a ubiquitinação adiciona ~8,5 kDa, portanto, uma banda em torno de 23 kDa pode ser observada.
• Para ELISA, podem ser usados formatos direto ou sanduíche. Considere revestir com o peptídeo ubiquitinilado ou com histona H2A ubiquitinilada recombinante para avaliar a ligação do anticorpo.
• Dada a ampla reatividade cruzada prevista (Humano, Camundongo, Rato e outros), valide o anticorpo em seu sistema de amostra específico antes de escalar.

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