UPF1/RENT1 pAb de coelho - Q92900

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da UPF1/RENT1

• UPF1 (Regulador de transcritos sem sentido 1), também conhecida como RENT1 ou hUpf1, é uma RNA helicase dependente de ATP e regulador principal do decaimento de mRNA mediado por códon sem sentido (NMD), uma via de vigilância que degrada mRNAs que contêm códons de terminação prematura. Referências relacionadas: PMID:11163187 PMID:16086026 PMID:18172165

• A enzima catalisa o desenrolamento dependente de ATP de duplexos RNA:DNA, RNA:RNA e DNA:DNA na direção 5'-3', com DNA de fita simples estimulando fortemente sua atividade ATPásica. Referências relacionadas: PMID:10999600 PMID:18066079 PMID:21419344 PMID:23275559 PMID:26138914 PMID:30218034

• Após a terminação da tradução, a UPF1 é recrutada para ribossomos parados e cicla entre os estados fosforilado e desfosforilado; sua fosforilação pela SMG1 é um interruptor crítico que aciona a NMD. Referências relacionadas: PMID:11544179 PMID:19417104 PMID:25220460

• Na via canônica dependente de EJC, a UPF1 se monta em um complexo SURF heterotrimérico e depois com UPF2/UPF3 para formar o complexo de vigilância ativo, que direciona os mRNAs alvo para o decaimento exonucleolítico e endonucleolítico. Referências relacionadas: PMID:21419344 PMID:12554878

• A UPF1 também atua em vias alternativas de NMD independentes de UPF2/UPF3 e medeia o decaimento de mRNA de histona dependente de replicação no final da fase S. Referências relacionadas: PMID:16086026 PMID:18172165 PMID:18447585

• A proteína se localiza no citoplasma, corpos de processamento (corpos P), núcleo e região perinuclear.

• A UPF1 é expressa de forma ubíqua, contém domínios de dedo de zinco e está sujeita a modificações pós-traducionais que incluem fosforilação, metilação e isomerização.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Como o imunógeno corresponde à região C-terminal (aa 819–1118), espera-se que o anticorpo reconheça todas as isoformas de UPF1 e seja adequado para detectar variantes de comprimento completo e truncadas em WB e IP.
• Para western blot, o peso molecular previsto é de ~124 kDa; use condições redutoras e valide com controles positivos (ex.: HeLa, HEK293) e negativos apropriados.
• Em imunofluorescência/ICC, a UPF1 geralmente apresenta um padrão punctiforme difuso citoplasmático e nuclear; as condições de permeabilização podem precisar de otimização.
• A reatividade cruzada relatada com camundongo e rato torna este anticorpo útil para estudos em modelos de roedores, mas a validação no sistema de amostra específico é recomendada.
• Para aplicações de ELISA e IP, a natureza policlonal pode fornecer alta sensibilidade, embora a titulação e otimização do bloqueio sejam aconselháveis.

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