Anticorpo monoclonal de coelho contra USP7/HAUSP para WB, IHC-P, ELISA - Q93009

Especificações e parâmetros principais do produto

Contexto biológico: função e localização da USP7/HAUSP

• A USP7/HAUSP é uma enzima desubiquitinadora que remove porções de ubiquitina das proteínas-alvo, regulando sua estabilidade e função. Ela cliva preferencialmente cadeias de ubiquitina ligadas por 'Lys-48' (PubMed:22689415).
  Referências relacionadas:
  PMID:22689415

• A USP7 desempenha um papel duplo na via de p53: ela desubiquitina e estabiliza a p53, intensificando a transcrição e a apoptose mediadas por p53 (PubMed:11923872, PubMed:25283148, PubMed:26786098), e também desubiquitina a MDM2, impedindo sua auto-ubiquitinação e promovendo a degradação da p53 mediada por MDM2 (PubMed:15053880, PubMed:16845383, PubMed:18566590).
  Referências relacionadas:
  PMID:11923872 | PMID:25283148 | PMID:26786098 | PMID:15053880 | PMID:16845383 | PMID:18566590

• Ela desubiquitina a FOXO4 de maneira dependente de peróxido de hidrogênio, inibindo a atividade transcricional da FOXO4 (PubMed:16964248), e regula a relocalização da PTEN do núcleo para o citoplasma por meio da interação com DAXX e PML (PubMed:18716620).
  Referências relacionadas:
  PMID:16964248 | PMID:18716620

• A USP7 está envolvida no reparo de danos ao DNA: promove o TC-NER ao desubiquitinar e estabilizar a ERCC6 em locais danificados por UV (PubMed:22466611, PubMed:22466612) e mantém a metilação do DNA ao desubiquitinar a DNMT1 e a UHRF1 (PubMed:21745816, PubMed:22411829).
  Referências relacionadas:
  PMID:22466611 | PMID:22466612 | PMID:21745816 | PMID:22411829

• Ela regula a estrutura da cromatina ao desubiquitinar a histona H2B e componentes do complexo semelhante ao PRC1 da Polycomb (PubMed:20601937), e modula o ritmo circadiano ao estabilizar a CRY1 e a CRY2 (PubMed:27123980).
  Referências relacionadas:
  PMID:20601937 | PMID:27123980

• A USP7 contribui para a patogênese viral: estabiliza a ICP0 dos herpesvírus e a EBNA1 do EBV, facilitando a degradação da PML e a replicação viral.

• Expressão tecidual: a USP7 é amplamente expressa, com superexpressão observada no câncer de próstata; está presente em células progenitoras neurais (PubMed:21258371).
  Referências relacionadas:
  PMID:21258371

• Localização subcelular: a USP7 alterna dinamicamente entre o núcleo, o citoplasma e os corpos de PML, além de se associar aos cromossomos durante a mitose.

Orientações experimentais e dicas técnicas

• O imunógeno corresponde aos aminoácidos 100–200 do domínio N-terminal da USP7 humana. Essa região é conservada entre humanos, camundongos e ratos, favorecendo a reatividade cruzada.
• Para Western blot, espere uma banda em torno de 128 kDa. Utilize um marcador de proteínas pré-corado e inclua controles positivos e negativos apropriados.
• Para IHC-P, otimize as condições de recuperação antigênica e a diluição do anticorpo primário utilizando tecidos conhecidos por expressar USP7 (por exemplo, câncer de próstata). Valide a especificidade da coloração com controles de isotipo.
• O desempenho no ELISA pode ser avaliado utilizando proteína USP7 recombinante; considere uma titulação em tabuleiro de xadrez para determinar a concentração ideal do anticorpo.
• Foi relatada reatividade cruzada com a USP7 de camundongo e rato. Ao utilizar modelos de roedores, confirme a reatividade no sistema de amostra relevante.

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