Anticorpo Monoclonal de Coelho contra βII-Tubulina/β2-Tubulina para WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q13885 / Q9BVA1

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da βII-Tubulina/β2-Tubulina

• A βII-Tubulina (TUBB2A) e a β2-Tubulina (TUBB2B) são isotipos de beta-tubulina da classe II que formam heterodímeros com a alfa-tubulina para gerar microtúbulos, polímeros essenciais do citoesqueleto.
• Os microtúbulos atuam como trilhas dinâmicas para o transporte intracelular, a formação do fuso mitótico e a manutenção da forma celular, crescendo pela adição de dímeros de tubulina ligados a GTP.
• As subunidades de β-tubulina contêm um sítio de ligação a GTP e regulam a estabilidade dos microtúbulos por meio da hidrólise de GTP, enquanto a alfa-tubulina fornece a atividade GTPase.
• A βII-Tubulina é altamente expressa no cérebro, correspondendo a até 30% de todas as beta-tubulinas, e desempenha um papel crítico no desenvolvimento e na função neuronal.
• Modificações pós-traducionais como acetilação, fosforilação e metilação modulam as propriedades dos microtúbulos e suas interações com proteínas motoras.
• Mutações no gene TUBB2A estão associadas a distúrbios neurológicos (por exemplo, displasia cortical complexa com outras malformações cerebrais 5), destacando sua importância para o sistema nervoso central.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno corresponde a um peptídeo dentro dos aminoácidos 346-445 da βII-Tubulina/β2-Tubulina humana (Q13885), uma região conservada entre TUBB2A e TUBB2B, o que torna o anticorpo adequado para detectar ambos os isotipos.
• Para Western blotting, é esperada uma banda em torno de 50 kDa; otimize as quantidades carregadas (geralmente 10-30 µg de proteína total) e a diluição do anticorpo para a sua amostra específica.
• Em imunohistoquímica (IHC-P), métodos de recuperação de antígeno com tampões de citrato ou EDTA podem aumentar o sinal, especialmente em tecidos fixados em formalina.
• Para imunofluorescência (IF/ICC), considere a permeabilização com Triton X-100 ou metanol para permitir o acesso do anticorpo à rede de microtúbulos.
• Valide a reatividade cruzada em amostras de camundongo ou rato comparando com lisados de células humanas, já que o anticorpo é relatado como reativo para as três espécies.
• Use controles adequados (por exemplo, marcação conjunta com alfa-tubulina) para confirmar a localização dos microtúbulos em experimentos de imagem.

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