Anticorpo Policlonal de Coelho XBP1 para WB, IF/ICC, ELISA - P17861

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do XBP1

• O XBP1 existe como duas isoformas principais: a forma não emendada (XBP1u) atua como um fator de transcrição fraco e regula principalmente a resposta à proteína desenovelada (UPR) por feedback negativo, enquanto a forma emendada (XBP1s) é um potente ativador transcricional de genes alvo da UPR. Referências relacionadas: PMID:8657566 PMID:16461360 PMID:11779464 PMID:25239945
• O XBP1 é central para a resposta à proteína desenovelada (UPR), ligando-se ao elemento de resposta ao estresse do RE (ERSE) e ao elemento UPR (UPRE) para aumentar a expressão de chaperonas do RE e componentes de degradação associados ao RE. Referências relacionadas: PMID:11779464 PMID:25239945
• A produção do XBP1s ativo envolve o emendamento citoplasmático não convencional do mRNA do XBP1 pela endoribonuclease IRE1α (ERN1) durante o estresse do RE. Referências relacionadas: PMID:19394296 PMID:21233347 PMID:23529610
• O XBP1u fornece feedback negativo visando o XBP1s para degradação mediada pelo proteassoma, prevenindo a hiperativação da UPR. Referências relacionadas: PMID:16461360 PMID:25239945
• O XBP1 localiza-se na membrana do retículo endoplasmático e transloca para o núcleo após ativação, com presença adicional no citoplasma.
• Em células imunes, o XBP1 é essencial para a diferenciação de plasmócitos e produção de imunoglobulinas, e é expresso na sinóvia reumatoide. Referências relacionadas: PMID:11460154
• O XBP1 contribui para a progressão do câncer: a superexpressão no câncer de mama promove a transição epitélio-mesenquimal (EMT) e metástase via upregulação do SNAI1. Referências relacionadas: PMID:25280941
• Em células endoteliais, o XBP1 promove a angiogênese induzida por VEGF e proliferação, e regula a autofagia através da ativação transcricional do BECN1. Referências relacionadas: PMID:23529610 PMID:23184933 PMID:19416856

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• Com base no design do imunógeno (proteína recombinante/peptídeo sintético correspondente aos a.a. 277–376 do XBP1 humano), o anticorpo pode reconhecer tanto as isoformas não emendadas (~29 kDa) quanto as emendadas (~55 kDa); a validação com controles específicos de isoforma ou indução de estresse do RE (ex: tunicamicina) é recomendada.
• Para Western blot (WB) usando este anticorpo policlonal de coelho, separe as proteínas em condições redutoras e espere uma banda próxima a 29 kDa para o XBP1u; a indução de estresse do RE pode deslocar o sinal para a forma emendada maior.
• Na imunofluorescência (IF/ICC), otimize a fixação (ex: 4% PFA) e a permeabilização (ex: 0,1% Triton X-100) para reter a localização no RE/núcleo; realize co-coloração com marcadores de organelas para confirmar a distribuição subcelular.
• Para ELISA, considere usar o anticorpo como reagente de captura ou detecção contra a proteína XBP1 recombinante ou lisados celulares; a titulação e as condições de bloqueio devem ser otimizadas para cada ensaio.
• A reatividade cruzada com camundongo e rato é relatada; no entanto, a homologia de sequência dentro da região do imunógeno deve ser verificada para o seu modelo experimental específico.

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