Anti-CD55 Anticorpo Monoclonal de Coelho para WB, IHC-P, ELISA - P08174

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização do Fator de Aceleração da Decaimento do Complemento (CD55)

• O CD55, também conhecido como fator de aceleração da decaimento (DAF), é uma glicoproteína de 41kDa que pertence à família das proteínas reguladoras do complemento e está ancorada à membrana celular por meio de uma porção de glicosilfosfatidilinositol (GPI).
• Sua função principal é proteger as células hospedeiras de danos mediados pelo complemento, ligando-se aos fragmentos C4b e C3b, impedindo a formação e acelerando a decaimento das convertases C3 e C5, inibindo assim a cascata de amplificação do complemento. Referências relacionadas: PMID:7525274 PMID:28657829
• O CD55 serve como receptor para vários enterovírus, incluindo coxsackievírus A21, B1, B3, B5, enterovírus humano 70 e D68, e echovírus 6, 7, 11, 12, 20, 21, facilitando a entrada viral nas células hospedeiras.
• É amplamente expresso nas membranas celulares de todos os tipos de células em contato com proteínas do complemento plasmático, incluindo células epiteliais que revestem compartimentos extracelulares, e também está presente em uma forma secretada em fluidos corporais.
• A proteína CD55 contém quatro repetições de consenso curtas (SCRs), também conhecidas como domínios sushi, e apresenta pontes dissulfeto que estabilizam sua estrutura; o splicing alternativo gera múltiplas isoformas.
• Variantes genéticas no CD55 estão associadas à síndrome de CHAPLE (hiperativação do complemento, trombose angiopática e enteropatia com perda de proteínas), e a molécula carrega o sistema de antígenos do grupo sanguíneo Cromer.

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 50-150 do CD55 humano, localizado na região N-terminal; esta região é extracelular e adequada para detectar proteínas nativas e desnaturadas.
• Para Western blotting, o CD55 migra a aproximadamente 41kDa em condições redutoras; use lisados de células humanas apropriados (por exemplo, HeLa, Jurkat) como controles positivos e valide a banda com inibidores conhecidos ou knockdown por siRNA.
• Em imuno-histoquímica (IHC-P), otimize a recuperação de antígeno (por exemplo, recuperação de epítopo induzida por calor) e a diluição do anticorpo primário; tecidos com alta expressão de CD55, como rim, pulmão ou endotélio vascular, são recomendados.
• Para ELISA, este anticorpo monoclonal pode ser empregado como anticorpo de captura ou detecção; realize titulações em tabuleiro (checkerboard) para determinar as concentrações ideais de revestimento e detecção.
• Como o CD55 é ancorado por GPI, considere o uso de tratamento com fosfolipase C específica para fosfatidilinositol (PI-PLC) para liberar a proteína da superfície celular para ensaios funcionais ou para confirmar a localização na membrana.

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