Anticorpo Policlonado de Coelho Anti-ADARB1 para WB, ELISA - P78563

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da ADARB1

• ADARB1 (editase 1 específica de RNA de fita dupla), também conhecida como ADAR2, DRADA2 ou RED1, é um membro da família das adenosina deaminas que atuam no RNA (ADAR) que catalisa a desaminação hidrolítica de adenosina para inosina (edição A-para-I) em substratos de RNA de fita dupla (dsRNA).
• A edição de RNA A-para-I realizada pela ADARB1 pode modular a expressão gênica por meio de múltiplos mecanismos, incluindo alteração de códons e recodificação de proteínas, regulação do splicing do pré-mRNA, modulação da estabilidade do RNA e influência na biogênese e direcionamento de microRNAs.
• ADARB1 é responsável pela edição seletiva de locais de transcritos neuronais chave, como receptores de glutamato (GRIA2 nos sítios Q/R e R/G, GRIK2), receptor de serotonina (HTR2C), receptor GABA (GABRA3) e canal de potássio dependente de voltagem (KCNA1), resultando em alterações de aminoácidos que modificam as propriedades dos canais iônicos e receptores.
• A enzima exibe efeitos provirais tanto dependentes quanto independentes de edição na replicação do HIV-1: ela edita diretamente o 5′UTR viral e suprime a ativação de EIF2AK2/PKR para aumentar a produção viral.
• O splicing alternativo e o uso alternativo de promotores geram múltiplas isoformas; a isoforma 1 tem menor atividade catalítica, enquanto a isoforma 2 exibe maior atividade catalítica in vitro.
• ADARB1 está localizada principalmente no núcleo e nucléolo, o que é consistente com seu papel na modificação do RNA co-transcricional e pós-transcricional.
• A expressão é mais alta no cérebro e coração, com níveis mais baixos na placenta, pulmão, fígado e rim; em astrocitomas pediátricos, a diminuição da atividade de edição de RNA se correlaciona com o grau de malignidade do tumor.
• A proteína contém domínios de ligação a RNA de fita dupla (dsRBDs) e um domínio de desaminase com um íon zinco coordenado, e é regulada por fosforilação. As associações de doenças incluem deficiência intelectual (NEDHYMS) e um papel na imunidade antiviral inata.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado é um fragmento recombinante correspondente aos aminoácidos 180–380 da ADARB1 humana (NP_001103.1). Esta região está localizada dentro do domínio catalítico/desaminase N-terminal, e os anticorpos gerados contra ela podem detectar o alvo em condições desnaturantes e nativas; recomendamos verificar a reatividade no seu tipo específico de amostra.
• O peso molecular previsto é de 81 kDa; confira a migração por SDS-PAGE em condições redutoras. Modificações pós-traducionais ou variantes específicas de isoformas podem alterar o peso molecular aparente.
• Para Western blot (WB), use controles positivos apropriados, como cérebro humano, coração ou linhas celulares conhecidas por expressar ADARB1. A reatividade cruzada com ortólogos de camundongo e rato permite o uso em estudos de modelos de roedores.
• Os protocolos de ELISA podem se beneficiar da otimização do antígeno de revestimento e da titulação do anticorpo. A natureza policlonal pode fornecer detecção sensível em formatos de ELISA sanduíche ou indireto quando pareada com um anticorpo de captura monoclonal validado.

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