Anticorpo Monoclonal de Coelho Anti-PARP1 para IF/ICC, IF-P, IHC-P, ELISA - P09874

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da PARP1

• A PARP1 é uma poli-ADP-ribosiltransferase que media a PARilação de proteínas, principalmente em resíduos de serina, e desempenha um papel fundamental no reparo de DNA. Referências relacionadas: PMID:17177976, PMID:18055453, PMID:18172500
• Ela inicia o reparo de quebras de DNA reconhecendo e ligando-se a quebras de DNA na cromatina, recrutando HPF1 e catalisando a PARilação de histonas (por exemplo, H2BS6ADPr, H3S10ADPr) para descompactar a cromatina e facilitar o acesso dos fatores de reparo. Referências relacionadas: PMID:17177976, PMID:18172500, PMID:19344625
• A PARP1 acumula-se em locais de dano no DNA juntamente com a TIMELESS e promove o reparo por recombinação homóloga de quebras de fita dupla mediando a poli-ADP-ribosilação. Referências relacionadas: PMID:26344098, PMID:30356214
• Predominantemente nuclear (cromatina, nucléolo), a PARP1 transloca-se dinamicamente para o citoplasma após dano no DNA ou apoptose, onde regula processos como a inibição da via cGAS-STING e a apoptose mediada por AIFM1. Referências relacionadas: PMID:35460603, PMID:33168626
• A PARP1 modula a transcrição ligando-se a nucleossomos e alterando a estrutura da cromatina como a histona H1, atuando tanto como um repressor quanto como um regulador dependente do contexto da elongação da RNA polimerase II. Referências relacionadas: PMID:15607977, PMID:22464733, PMID:27256882, PMID:35393539
• Durante a apoptose, a PARP1 é clivada pela caspase-3/7, gerando fragmentos que translocam para o citoplasma, sofrem auto-poli-ADP-ribosilação e servem como um carreador pró-apoptótico de poli-ADP-ribose para induzir a morte celular mediada por AIFM1. Referências relacionadas: PMID:33168626

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno é um peptídeo sintético correspondente aos aminoácidos 700–800 do PARP1 humano (P09874). Esta região está dentro do domínio catalítico, o que pode contribuir para a especificidade do anticorpo para a PARP1 de comprimento total.
• Para imunofluorescência (IF/ICC e IF-P), considere o uso de protocolos apropriados de fixação e permeabilização, e inclua linhagens celulares ou tecidos controles positivos e negativos conhecidos.
• Para imuno-histoquímica (IHC-P), as condições de recuperação antigênica e a diluição do anticorpo devem ser otimizadas empiricamente; use tecidos humanos, de camundongo ou rato com expressão confirmada de PARP1 como controles positivos.
• No ELISA, o pareamento com um anticorpo de detecção apropriado pode aumentar a sensibilidade; valide o ensaio com proteína PARP1 recombinante ou lisados celulares.
• Devido ao alto peso molecular (113kDa), garanta condições ótimas de transferência de proteína se usar western blotting como um método ortogonal.

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