Anticorpo monoclonal de coelho Phospho-p53-S376 para WB, ELISA - P04637

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da p53

• Fator de transcrição multifuncional que atua como supressor tumoral induzindo parada do ciclo celular ou apoptose após danos no DNA. Funciona ligando-se a sequências específicas de DNA para regular a expressão de genes alvo. Referências relacionadas: PMID:11025664, PMID:12524540, PMID:12810724
• Medeia a apoptose em parte através da ativação transcricional de genes pró-apoptóticos como BAX e FAS, e da repressão do Bcl-2 anti-apoptótico. A atividade pró-apoptótica é modulada por interações com as proteínas ASPP PPP1R13B e TP53BP2, que podem ser deslocadas pelo inibidor iASPP. Referências relacionadas: PMID:12524540, PMID:17189187
• Regula negativamente a divisão celular ao controlar a expressão de inibidores do ciclo celular como o inibidor de cinase dependente de ciclina p21, e pode inibir a atividade da cinase CDK7 em resposta a danos no DNA.
• Localiza-se no núcleo em condições normais, mas pode translocar para o citoplasma, mitocôndrias e outros compartimentos; também é encontrado em corpos PML nucleares, centrossomos e retículo endoplasmático, refletindo suas diversas funções.
• Sofre inúmeras modificações pós-tradução, incluindo fosforilação, acetilação, metilação, ubiquitinação e sumoilação, que regulam sua estabilidade, ligação ao DNA e atividade transcricional.
• É expresso de forma ubíqua nos tecidos; múltiplas isoformas são geradas por splicing alternativo e uso de promotores, algumas exibindo expressão tecido-específica e funções regulatórias (ex.: a isoforma 2 aumenta a transativação, a isoforma 4 a suprime, a isoforma 7 inibe a apoptose).
• Regula o ritmo circadiano ao reprimir a ativação mediada por CLOCK-BMAL1 do gene PER2. Referências relacionadas: PMID:24051492
• Atua como um supressor tumoral chave, com mutações no TP53 associadas à síndrome de Li-Fraumeni e muitos cânceres esporádicos, destacando seu papel crítico na manutenção da estabilidade genômica.

Orientações Experimentais e Dicas Técnicas

• Este anticorpo foi gerado contra um fosfopeptídeo sintético correspondente aos resíduos ao redor da S376 do p53 humano. Garanta a detecção correta do status de fosforilação usando inibidores de fosfatase durante a lise celular e preparação da amostra.
• Para Western blotting, o tratamento de células com agentes danificadores do DNA (ex.: doxorrubicina ou irradiação UV) pode aumentar a fosforilação de p53 na S376, servindo como controle positivo. O peso molecular previsto é de aproximadamente 44 kDa, mas múltiplas bandas podem aparecer devido às isoformas de splicing.
• Em ELISA, considere usar a proteína p53 recombinante fosforilada na S376 como padrão e valide a especificidade do ensaio com controles de peptídeo não fosforilado.
• A reatividade cruzada foi confirmada com p53 humano e de rato; para outras espécies, é recomendada a análise de homologia de sequência ao redor da S376 antes do uso.

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