Asymmetric DiMethyl-Histone H4-R3 Rabbit pAb | P62805 | Validado para WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA

Especificações e Parâmetros Principais do Produto

Contexto Biológico: Função e Localização da Histona H4

A histona H4 é um componente central do nucleossoma, em torno do qual o DNA é enrolado para formar a cromatina. Esta estrutura fundamental compacta o DNA genómico e regula a sua acessibilidade a enzimas e outros fatores necessários para processos dependentes de DNA, tais como transcrição, replicação e reparação. As histonas, incluindo a H4, são, portanto, centrais para a manutenção da estabilidade cromossómica e do controlo epigenético.

Um conjunto complexo de modificações pós-traducionais, frequentemente referido como o código das histonas, regula a dinâmica da cromatina. A histona H4 sofre inúmeras modificações, incluindo acetilação, metilação, fosforilação e citrulinização, em vários resíduos ao longo da sua caixa N-terminal e domínio globular.

Este anticorpo visa especificamente a dimetilação assimétrica da arginina 3 (R3) na caixa N-terminal da histona H4. Na proteína processada, isto corresponde ao resíduo 4 (R4). Esta modificação é catalisada principalmente pela proteína arginina metiltransferase 1 (PRMT1) e desempenha um papel na ativação transcricional e na remodelação da cromatina.

Referências relacionadas: PMID:11387442, PMID:11448779, PMID:15345777

A histona H4 localiza-se no núcleo e nos cromossomas. Durante a espermatogénese, a acetilação da H4 está associada à sua localização nuclear em espermátides no passo 11.

Referências relacionadas: UniProtKB P62805

Orientação Experimental e Dicas Técnicas

• O imunógeno utilizado para este anticorpo é um peptídeo sintético que carrega dimetilação assimétrica em R3, garantindo alta especificidade para a forma metilada da histona H4. Considere validar a especificidade comparando sinais de ensaios de competição com peptídeos metilados versus não metilados.
• Para Western blot (WB), são recomendados protocolos de extração de histonas que enriqueçam proteínas nucleares ou ligadas à cromatina. O peso molecular previsto da histona H4 é de aproximadamente 11 kDa, embora possa migrar ligeiramente mais alto ou como uma banda dependendo da extensão de outras modificações e das condições do gel.
• Em imunofluorescência (IF/ICC) e imunohistoquímica (IHC-P), espere coloração nuclear. As condições de permeabilização e fixação podem necessitar de otimização para preservar o reconhecimento do epítopo enquanto expõe o compartimento nuclear.
• Ao utilizar este anticorpo em ELISA, considere revestir com peptídeo metilado ou extratos de histonas para detetar a atividade de ligação. Inclua sempre controlos apropriados para excluir a ligação não específica.
• Relatou-se que este anticorpo deteta H4 de humano, camundongo e rato, com uma ampla gama de outras espécies prevista. A reatividade cruzada deve ser verificada no sistema de amostra relevante se trabalhar com modelos não mamíferos.

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